فلوروسینس فلٹر کیا ہے؟

اخراج فلٹر

اخراج کے فلٹرز نمونے سے مطلوبہ فلوروسینس کو ڈیٹیکٹر تک پہنچنے کی اجازت دینے کا مقصد پورا کرتے ہیں۔ وہ چھوٹی طول موج کو روکتے ہیں اور طویل طول موج کے لیے زیادہ ترسیل رکھتے ہیں۔ فلٹر کی قسم ایک عدد کے ساتھ بھی منسلک ہوتی ہے، مثال کے طور پر BA510IF فگر میں (مداخلت میں رکاوٹ والا فلٹر)، اس عہدہ سے مراد اس کی زیادہ سے زیادہ ترسیل کے 50% پر طول موج ہے۔

ایکسائٹیشن فلٹرز کے لیے وہی سفارشات ایمیشن فلٹرز کے لیے درست ہیں: کم از کم ٹرانسمیشن، بینڈوتھ، OD، اور CWL۔ مثالی CWL، کم سے کم ٹرانسمیشن، اور OD کے امتزاج کے ساتھ ایک اخراج فلٹر سب سے زیادہ گہرے ممکنہ بلاکنگ کے ساتھ، روشن ترین ممکنہ تصاویر فراہم کرتا ہے، اور سب سے کم اخراج سگنلز کا پتہ لگانے کو یقینی بناتا ہے۔

ڈیکروک آئینہ

ڈیکروک آئینے کو ایکسائٹیشن فلٹر اور ایمیشن فلٹر کے درمیان 45 ° زاویہ پر رکھا جاتا ہے اور ڈیٹریکٹر کی طرف اخراج سگنل منتقل کرتے ہوئے فلوروفور کی طرف جوش کے سگنل کی عکاسی کرتا ہے۔ مثالی ڈیکروک فلٹرز اور بیم سپلٹرز میں زیادہ سے زیادہ عکاسی اور زیادہ سے زیادہ ٹرانسمیشن کے درمیان تیز ٹرانزیشن ہوتے ہیں، جس میں ایکسائٹیشن فلٹر کی بینڈوتھ کے لیے>95% ریفلیکشن اور ایمیشن فلٹر کی بینڈوتھ کے لیے>90% کی ٹرانسمیشن ہوتی ہے۔ آوارہ روشنی کو کم سے کم کرنے اور فلوروسینٹ امیج سگنل ٹو شور کے تناسب کو زیادہ سے زیادہ کرنے کے لیے فلوروفور کی انٹرسیکشن ویو لینتھ (λ) کے ساتھ فلٹر کا انتخاب کریں۔

اس اعداد و شمار میں ڈیکروک آئینہ DM505 ہے، اس لیے یہ نام دیا گیا ہے کیونکہ 505 نینو میٹر اس آئینے کے لیے زیادہ سے زیادہ ترسیل کے 50% پر طول موج ہے۔ اس آئینے کے لیے ٹرانسمیشن وکر 505 nm سے اوپر ہائی ٹرانسمیشن، 505 نینو میٹر کے بائیں طرف ٹرانسمیشن میں ایک تیز کمی، اور 505 نینو میٹر کے بائیں طرف زیادہ سے زیادہ عکاسی دکھاتا ہے لیکن پھر بھی کچھ ٹرانسمیشن 505 nm سے کم ہو سکتی ہے۔

لانگ پاس اور بینڈ پاس فلٹرز میں کیا فرق ہے؟

فلوروسینس فلٹرز کو دو اقسام میں تقسیم کیا جا سکتا ہے: لانگ پاس (LP) اور بینڈ پاس (BP)۔

لانگ پاس فلٹرز لمبی طول موج کو منتقل کرتے ہیں اور چھوٹے کو روکتے ہیں۔ کٹ آن ویو لینتھ چوٹی ٹرانسمیشن کے 50% کی قدر ہے، اور کٹ آن کے اوپر کی تمام طول موجیں لانگ پاس فلٹرز کے ذریعے منتقل ہوتی ہیں۔ وہ کثرت سے ڈیکروک آئینے اور اخراج فلٹرز میں استعمال ہوتے ہیں۔ لانگ پاس فلٹرز کا استعمال اس وقت کیا جانا چاہئے جب ایپلی کیشن کو زیادہ سے زیادہ اخراج جمع کرنے کی ضرورت ہو اور جب سپیکٹرل امتیاز مطلوبہ یا ضروری نہ ہو، جو عام طور پر ان تحقیقات کے لیے ہوتا ہے جو نسبتاً کم پس منظر کے آٹو فلوروسینس کے نمونوں میں ایک ہی اخراج کرنے والی نوع پیدا کرتے ہیں۔

بینڈ پاس فلٹرز صرف ایک مخصوص طول موج کے بینڈ کو منتقل کرتے ہیں، اور دوسروں کو روکتے ہیں۔ وہ فلوروفور اخراج اسپیکٹرم کے صرف مضبوط ترین حصے کو منتقل کرنے کی اجازت دے کر کراس اسٹالک کو کم کرتے ہیں، آٹو فلوروسینس شور کو کم کرتے ہیں اور اس طرح اعلی پس منظر کے آٹو فلوروسینس نمونوں میں سگنل ٹو شور کے تناسب کو بہتر بناتے ہیں، جو طویل پاس کے فلٹرز پیش نہیں کر سکتے۔

بیسٹ اسکوپ کتنی قسم کے فلوروسینس فلٹر سیٹ فراہم کر سکتا ہے؟

فلٹرز کی کچھ عام اقسام میں نیلے، سبز اور بالائے بنفشی فلٹرز شامل ہیں۔ جیسا کہ جدول میں دکھایا گیا ہے۔